周庭银：海军军医大学附属长征医院实验诊断科主任技师。从事临床微生物检验及科研工作40余年，在临床微生物鉴定 方面积累了丰富的经验，尤其是对疑难菌、少见菌株鉴定的 研究有独到之处。在国内首次发现卫星状链球菌、星座链球 菌、霍氏格里蒙菌、拟态弧菌等多株新菌株。近年来先后帮 助国内多家医院鉴定４０余株疑难菌株。主办国家医学继续 教育“疑难菌株分离与鉴定”学习班22期（培训2800余人），2013年发起成立上海疑难菌读片会，并已成功举办15期。 成功研究并解决了血培养瓶内有细菌生长，但革兰染色看不 到菌、转种任何平板无细菌生长这一难题。研制了新型双向 显色血培养瓶、多功能体液显色培养瓶、尿培养快速培养基、 抗酸杆菌消化液，以及一种既适用于痰细菌培养，又适用于 结核分枝杆菌和抗酸杆菌培养的痰标本液化留置容器。 王华梁：上海市临床检验中心主任，现任全国卫生产业企业管理协会实验医学分会主任委员，中国妇幼保健协会临床诊断与实验医学分会名誉主任委员，中国医师协会检验医师分会分子诊断专家委员会主任委员，中国健康促进基金会质谱精准检验专家委员会主任委员，中国医院协会临床检验管理专业委员会副主任委员，中国遗传学会遗传诊断分会副主任委员，中国医师协会临床精准医疗专业委员会常务委员，国家卫生标准委员会委员，国家卫生健康委临床检验中心专家委员会委员，中华医学会医疗鉴定专家，中国合格评定国家认可委员会ISO 15189主任评审员及17025、17043评审员等。

    “医学实验室ＩＳＯ１５１８９认可指导丛书”以ＣＮＡＳ ＣＬ０２：２０１２《医学实验室质量和能力 认可准则》为指导，由全国医学检验各专业领域的专家共同编写，对开展ＩＳＯ１５１８９医学实验 室认可有重要的指导意义和实用价值。 本书共分２篇２０章。第一篇为管理要求，主要介绍组织和管理、质量管理和实验室安全 管理等方面的操作程序。第二篇为技术要求，从标本采集、临床标本的细菌学检验、抗菌药物 敏感试验等方面来阐述临床微生物实验室相关操作规程，包括检验前质量管理、实验室仪器设 备、常用培养基及试剂、血清学试验、微生物相关抗体抗原检测、各种染色方法、各种标本的涂 片镜检与培养、常见病原菌及高致病菌检验、手工检验人员比对与仪器性能验证等标准操作规 程。附录部分不仅收录了实验室管理、仪器和设备以及质量控制等方面常用的记录表格，方便 读者直接引用，而且列举了微生物室现场评审不符合项等，有利于读者借鉴和参考，指导作用 突出。 本书内容全面，编排格式规范，言简意赅，指导性强，可作为正在准备或已经通过ＩＳＯ １５１８９认可的医院临床微生物实验室的指导书，又可作为基层医院微生物室常规工作的管理 规范和操作手册，还可作为临床微生物专业学习的培训教材。

第一篇管理与技术要求 / 001

第一章·分子诊断实验室人员岗位设置及管理002

分子诊断实验室组织结构 / 003

分子诊断实验室人员资质和岗位责任 / 006

分子诊断实验室人员培训及能力评估 / 008

第二章·分子诊断实验室设施与环境010

分子诊断实验室设施和环境条件程序 / 011

分子诊断实验室生物安全风险处置程序 / 014

分子诊断实验室防污染管理程序 / 016

第三章·标本采集与接收程序018

检验项目申请程序 / 019

标本采集、运送、接收与保存程序 / 021

第四章·检验方法性能评价程序023

分子定量项目性能验证标准操作规程 / 024

分子定性项目性能验证标准操作规程 / 028

核酸提取效率验证标准操作规程 / 032

第五章·质量保证034

能力验证、实验室间比对程序 / 035

室内质量控制管理程序 / 038

室内人员比对、留样再测程序 / 041

检测系统间比对程序 / 042

风险评估管理程序 / 043

质量指标管理程序 / 046

工作流程管理程序 / 049

第六章·结果报告程序051

感染性疾病分子检验结果报告程序 / 052

遗传性疾病分子检测结果报告程序 / 054

NGS分子检验结果报告程序 / 056

药物敏感相关基因分子检验结果报告程序 / 059

第二篇分子诊断标准操作规程 / 061

第七章·仪器设备标准操作规程062

第一节主要仪器设备标准操作规程 / 063

荧光定量扩增仪标准操作规程 / 063

全自动核酸提取仪标准操作规程 / 065

全自动核酸提取工作站标准操作规程 / 067

焦磷酸测序仪标准操作规程 / 070

DNA序列分析仪标准操作规程 / 075

高通量测序仪标准操作规程 / 082

DNA打断仪标准操作规程 / 090

数字PCR系统标准操作规程 / 095

微阵列芯片扫描仪标准操作规程 / 101

第二节辅助仪器设备标准操作规程 / 104

生物安全柜标准操作规程 / 104

超净工作台标准操作规程 / 106

紫外线消毒车标准操作规程 / 108

干式恒温器标准操作规程 / 110

高速冷冻离心机标准操作规程 / 111

旋涡振荡器标准操作规程 / 113

加样器标准操作规程 / 114

-70℃冰箱标准操作规程 / 115

荧光显微镜标准操作规程 / 117

第八章·检验方法标准操作规程119

第一节感染性疾病分子检验项目标准操作规程 / 120

乙型肝炎病毒核酸检测标准操作规程 / 120

丙型肝炎病毒核酸检测标准操作规程 / 124

乙型肝炎病毒基因分型标准操作规程 / 128

高灵敏HBV　DNA检测标准操作规程 / 131

高灵敏HCV　RNA检测标准操作规程 / 135

丙型肝炎病毒基因分型标准操作规程 / 139

结核分枝杆菌DNA定量检测标准操作规程 / 143

EB病毒DNA定量检测标准操作规程 / 147

巨细胞病毒DNA定量检测标准操作规程 / 152

单纯疱疹病毒DNA定量检测标准操作规程 / 156

肺炎支/衣原体DNA定量检测标准操作规程 / 160

淋球菌核酸检测标准操作规程 / 164

沙眼衣原体核酸检测标准操作规程 / 167

解脲脲原体核酸检测标准操作规程 / 170

人乳头瘤病毒核酸检测标准操作规程 / 173

人类免疫缺陷病毒核酸定性检测标准操作规程 / 176

人类免疫缺陷病毒核酸定量检测标准操作规程 / 179

人乳头瘤病毒基因分型检测标准操作规程 / 183

B族链球菌核酸检测标准操作规程 / 186

第二节遗传性疾病分子检验方法标准操作规程 / 189

Y染色体微缺失检测标准操作规程 / 189

PAH基因突变检测标准操作规程 / 192

遗传性耳聋基因检测（PCR芯片法）标准操作规程 / 195

遗传性耳聋基因检测（荧光PCR法）标准操作规程 / 198

遗传性药物性耳聋基因检测标准操作规程 / 201

地中海贫血基因检测标准操作规程 / 205

第三节二代测序检验方法标准操作规程 / 214

二代测序检验项目中核酸提取操作规程 / 214

BRCA基因突变检测标准操作规程 / 221

肺癌个体化基因检测项目标准操作规程 / 234

乳腺癌基因突变检测标准操作规程 / 255

淋巴瘤基因突变检测标准操作规程 / 258

BRAFV600E基因突变检测标准操作规程 / 261

EGFR基因突变标准操作规程 / 264

HER2基因扩增荧光原位杂交标准操作规程 / 268

实体肿瘤相关基因检测标准操作规程 / 275

第四节药物敏感性相关分子检验方法标准操作规程 / 281

CYP2C19基因多态性检测标准操作规程 / 281

CYP2D6*10多态性检测（PCR熔解曲线法）标准操作规程 / 285

CYP2D6*10多态性检测（基因芯片法）标准操作规程 / 289

MTHFR（C677T）基因多态性检测标准操作规程 / 294

CYP2C9和VKORC1基因多态性检测标准操作规程 / 298

乙型肝炎耐药基因多态性检测标准操作规程 / 302

结核分枝杆菌耐药基因多态性检测标准操作规程 / 307

万古霉素耐药基因检测标准操作规程 / 309

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因检测标准操作规程 / 311

附录313

一、 常用表格 / 314

二、 现场评审常见不符合项举例 / 351